Описание

Реагент для определения альфа 1-кислого гликопротеина.

Иммунотурбидиметрический метод для определения альфа 1-кислый гликопротеин.

Набор содержит специфичную анти-альфа 1-кислый гликопротеин поликлональную антисыворотку (2х1 мл), буфер для разведения антисыворотки (1х10 мл), рабочий буферный раствор (2х50 мл) в специальных флаконх для автоматической обработки. Соотношение: разведенный образец /Реагент А/Раствор ВС 1/18/2. Длина волны 340. Диапазон измерений: 20-600 мг/дл.

Альфа 1-кислый гликопротеин

Количественное иммунотурбидиметрическое определение альфа 1-кислого гликопротеина в сыворотке и плазме крови.

Реагент А: 2 х 50 мл. Реагент В: 2 х 1 мл. Реагент С: 1 х 10 мл.   

REF 11135D:                       

IVD: медицинское устройство для диагностики in vitro.                                 

Реагент: определение относится к определенному реагенту.

Стандарт / калибратор: определение относится к стандарту / калибратору.

Контроль: определение относится к контролю.

Меры безопасности при применении:

Помимо возможных рисков в отношении химически активных компонентов реактива, продукт может содержать такие неактивные компоненты, как консерванты (например, азид натрия или другие) и детергенты. Общая концентрация этих компонентов ниже пределов, указанных в ранее изданных Директивах 67/548/ЕЕС и 88/379/ЕЕС и дополнениях и изменениях в отношении классификации, маркировки и упаковки опасных химических соединений (реагентов). Однако, рекомендуется осторожное обращение с продуктом, необходимо также избегать контактов с глазами, кожей и слизистой оболочкой, приема внутрь, и применять лабораторные реагенты в соответствии с правилами добросовестной лабораторной практики.

Резюме:

Возрастание уровня альфа 1-кислого гликопротеина может отмечаться при воспалительных процессах и при опухолях с клеточным некрозом.  Измерение уровня альфа 1-кислого гликопротеина полезно при дифференциации между острыми фазовыми реакциями (повышение уровня в сыворотке крови) и эстрогенными эффектами (нормальный или сниженный уровни в сыворотке крови).

Принцип тестирования:

Определение альфа 1-кислого гликопротеина основано на турбидиметрической специфической реакции, которая происходит между анти-альфа 1-кислой гликопротеиновой поликлональной антисывороткой и ее соответствующим антигеном при оптимальном рН и в присутствии полимера полиэтиленгликоля (РЕG). Мутность иммунокомплекса пропорциональна концентрации аналита, присутствующего в анализируемом образце.

Реагенты:

Реагенты, при их хранении при температуре 2-8 0С в закрытых флаконах, стабильны в течение срока годности, указанного на упаковке.

Компоненты набора и начальная концентрация химически активных компонентов:

- Реагент А:

Фосфатный буфер 20 ммоль / л, рН = 7.5; РЕG ≤ 7 %; натрия хлорид 150 ммоль / л, натрия азид < 0.1 %.

- Реагент B:

анти-альфа 1-кислого гликопротеина поликлональная антисыворотка; натрия азид < 0.1 %.

- Реагент С:

буферный раствор Гуда 50 ммоль / л, рН = 7.5; РЕG ≥ 5 %; натрия хлорид 150 ммоль / л, натрия азид < 0.1 %.

- Флакон:

Пустой флакон вместимостью 20 мл, который может использоваться для приготовления Раствора ВС, с установкой на панели автоматических анализаторов некоторых марок. Указания по применению и подробная информация о применении распространенных приборов предоставляется по запросу.

Штрих-код и номер флакона, если они напечатаны на этикетках реагентов, относятся к применению продукта на анализаторах Hitachi 911/912. Подробная информация о применении предоставляется по запросу.

Приготовление растворов реагентов:

Реагент А: готов к применению. Реагент, при его хранении при температуре 2-8 0С в закрытых флаконах, стабилен в течение срока годности, указанного на упаковке. Стабильность: 120 дней при температуре 2-8 0С после вскрытия, если избегать контаминации и немедленно после использования закрывать флакон.

Раствор ВС: развести 1 объем Реагента В и тремя объемами Реагента С, осторожно перемешать, избегая пенообразования.  Стабильность: 60 дней при температуре 2-8 0С после вскрытия, если избегать контаминации и немедленно после использования закрывать флакон.

Калибровка:

Для калибровки рекомендуется применение следующих материалов:

Plasmaproteins Cаl                                      REF 11200D:                                               3 х 1 мл.        

Жидкая сыворотка для калибровки. Использовать калибратор для построения калибровочной кривой согласно следующей таблице.      

Plasmaproteins Cаl 3х                                REF 11206D:                                               4 х 1 мл.        

Жидкая сыворотка для калибровки. Использовать калибратор для построения калибровочной кривой согласно следующей таблице.      

Используйте калибратор REF 11200D для построения калибровочной кривой согласно данным таблице ниже. Калибратор, в отличие от анализируемых образцов, не требуется предварительно разводить в отношении 1 : 21.

Построение калибровочной кривой:

Рабочие калибраторы

1

2

3

4

5

Plasmaproteins Cаl REF 11200D

200 мкл

-

-

-

-

Физиологический раствор

800 мкл

300 мкл

300 мкл

300 мкл

300 мкл

Рабочий калибратор 1

-

300 мкл

-

-

-

Рабочий калибратор 2

-

-

300 мкл

-

-

Рабочий калибратор 3

-

-

-

300 мкл

-

Рабочий калибратор 4

-

 

-

-

300 мкл

Коэффициент разведения

1 : 5

1 : 10

1 : 20

 1 : 40

1 : 80

 

Аналит в мг/дл соответствует:

- 1 : 21 разведения образца

сыворотки                                  4.2 х (С)        2.1 х (С)        1.05 х (С)      0.525 х (С)     0.2625 х (С)

- неразведенный образец мочи.

(С) = концентрация аналита в мг/дл, указанная в инструкции к набору Plasmaproteins Cаl REF 11200D. Аналит: Альфа 1-кислый гликопротеин.

Контроль качества:

Для подтверждения точности теста рекомендуется использовать следующие контрольные материалы для различных концентраций аналита:

Immuno Control 1                 REF 11210     1 x 5 (мл).

Immuno Control 2                 REF 11212     1 x 5 (мл).

Жидкая контрольная сыворотка. Для применения следовать инструкциям к тест-набору.

Набор Immuno Control (2 уровня)              REF 11211А  2 x (2 х 1) (мл).

Жидкая контрольная сыворотка двух уровней концентрации. Для применения следовать инструкциям к тест-набору.

Стандартизация:

CRM 470 (сертифицированный материал сравнения) от BCR (EG Community Bureau of Reference), соответствующий стандарту RPPHS (раствор сравнения для определения белка в сыворотке крови человека).

Анализируемый образец:

Сыворотка или плазма (EDTA, гепаринизированная). Забор образцов вести в соответствии с процедурой NCCLS, указанной в библиографии (1).  Стабильность образца сыворотки / плазмы: 3 дня при температуре 2-8 0С.

Приготовление анализируемых образцов / контролей:

Сыворотка: Контрольные образцы сыворотки / плазмы: перед началом анализа развести в соотношении 1 : 21 (1 объем + 20 объемов) физиологическим раствором.

Требуемые оборудование и материалы, не входящие в комплект поставки:

- обычное лабораторное оборудование.

- фильтры, фотометр или спектрофотометр.

- дистиллированная вода.

- физиологический раствор (концентрация натрия хлорида 9 г/л).

Аналитическая процедура:

Длина волны: 340 (334 – 365) нм.

Длина ячейки:   1 см.

Температура:     37 0С.

Доля образца (см. приготовление) / реагента А / раствора ВС:  1 /18 / 2.

Реакция:   конечная точка (рост).

Перед процедурой дать реагентам достичь рабочей температуры. Пропорциональное изменение объемов реагентов, указанных для аналитической процедуры, не влияет на результат.

 

Перенести в кювету:

Эталонный раствор

Калибратор

Анализируемый образец / контроль

Физиологический  раствор

50 мкл

-

-

Рабочие калибраторы (1, 2, 3, 4, 5)

-

50 мкл

-

Сыворотка: разбавленный анализируемый образец / контроль (см. приготовление)

50 мкл

Реагент А

900 мкл

900 мкл

900 мкл

Раствор ВС

100 мкл

100 мкл

100 мкл

 

Тщательно смешать и инкубировать 10 минут при рабочей температуре. Провести считывание оптической плотности каждого калибратора, анализируемого образца и контроля относительно определения оптической плотности эталонного раствора.

Расчеты:

1. Построить калибровочную кривую на разграфленной бумаге путем переноса величины оптической плотности на ось У относительно соответствующей концентрации на оси Х для каждого рабочего калибратора.

2. Отметить величины оптической плотности, полученной для каждого анализируемого образца и контроля на калибровочной кривой.

3. Определить величину (концентрацию) для каждого анализируемого образца и контроля по калибровочной кривой.

Коэффициент пересчета: Альфа 1-кислый гликопротеин: (мг/дл) х 0.01 = Альфа 1-кислый гликопротеин (г/л).

Референтные величины:

Сыворотка: 50 – 120 (мг/дл).

Рекомендуется, чтобы в каждой лаборатории был установлен свой референтный диапазон. Для диагностических целей полученные результаты необходимо всегда оценивать с учетом истории болезни пациента и всех других клинических показателей.

Процедура анализа:

Полученные результаты анализа являются данными клинической оценки, выполненной согласно определенному протоколу.  

Нижний предел обнаружения: Для сыворотки: 8 мг/дл. Нижний предел обнаружения представляет минимальную обнаруживаемую концентрацию аналита, которая отличается от нулевого стандарта.

Феномен "прозоны": феномена "прозоны" не обнаруживается при концентрации до 1900 мг/дл для образцов сыворотки.

Полученные данные по точности внутри определения, точности между определениями и погрешностью являются репрезентативными для результатов определения, полученных с применением автоматического анализатора на рандомизированно отобранных образцах сыворотки, с автоматическим разведением образца. Результаты могут изменяться в зависимости от характеристик прибора.

Точность внутри определения: определяется на 20 повторностях каждого контроля (тестируются два уровня аналита – L1/L2). Получены следующие результаты:

 

L1 (мг/дл)

L2 (мг/дл)

среднее

45.90

131.45

SD

1.41

2.26

CV %

3.07

1.72


Точность между определениями: определяется в течение 10 дней на 2 повторностях каждого контроля (2 уровня – L1 / L2). Получены следующие результаты:

 

Среднее, мг/дл

SD

CV %

SD

CV %

SD

CV %

Внутри  серии испытаний

Между  сериями испытаний

Итого

Итого

L1

49.10

0.95

1.93

1.77

3.61

2.01

4.10

L2

136.10

1.48

1.09

4.94

3.63

5.16

3.79

 

Корреляция: Данный тест (y) сравнивался с коммерческим турбидиметрическим тестом (х). Получены следующие результаты:

N = 60, r = 0.99451; y = 0.97602 x – 2.9841.

Измеряемый диапазон:  Для сыворотки: 20 – 600 мг/дл. Образцы с концентрацией аналита выше измеряемого диапазона необходимо разбавить физиологическим раствором и полученный результат умножить на коэффициент разведения.

Интерференция: на результат теста не влияет присутствие конъюгированного и не конъюгированного билирубина в концентрации до 30 мг/дл, гемоглобина в концентрации до 0.5 г/дл, липемии (содержание триглицеридов в концентрации до 1000 мг/дл) и ревматоидного фактора в концентрации до 1000 МЕ/мл.  Ложное занижение уровней аналита может отмечаться в пробах от пациентов с моноклональными гаммопатиями (особенно, IgM-типа).

Утилизация отходов:

Утилизацию реагентов производят в соответствии с требованиями местных законодательных норм.

Библиография:

1. NCCLS. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard – Fifth Edition (H3-A5). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, 2003.

2. Kaplan L.A., Pesce A.J. Clinical Chemistry, Mosby Ed., 1996.

3. EU-Dir 1999/11 Commission Directive of 8 March 1999 adapting to technical progress the principles of Good Laboratory Practice as specified in Council Directive 87/18/EEC.

4. Tietz Textbook of Clinical Chemistry (Edited by Burtis CA and Ashwood ER Eds). Third Edition WB Saunders Company (1999).

 

SENTINEL DIAGNOSTICS

SENTINEL CH.SpA – Ph. + 39 02 3455141

Via Robert Koch, 2 Milano 20152 Italy

www.sentineldiagnostics.com

 

Заявка на покупку

Хотите получить больше информации?Обращайтесь к нам:+7 (495) 933-21-46