МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ

Помимо возможных рисков, связанных с активными компонентами реактивы могут содержать дополнительные неактивные компоненты, такие как консерванты (например, азид натрия или другие), а также детергенты. Общая концентрация этих компонентов ниже предельно допустимой нормы, предусмотренной директивами 67/548/EEC и 1999/45/EC. Были соблюдены все требования по классификации, маркировке и упаковки реактивов (опасных препаратов). Однако рекомендуется с реактивами работать осторожно, необходимо избегать попадания их в организм, в глаза, на кожу и слизистые оболочки. С реактивами необходимо работать с соблюдением правил надлежащей лабораторной практики.

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Определение уровня церулоплазмина полезно в случаях заболеваний центральной нервной системы неясной этиологии. Низкий уровень церулоплазмина встречается при синдроме Менкеса, нефротическом синдроме и при тяжелых заболеваниях печени. Уровень церулоплазмина повышается при различных опухолевых и воспалительных состояниях.

ПРИНЦИП

Определение церулоплазмина основывается на иммунотурбидиметрической специфической реакции при взаимодействии поликлональных антител к церулоплазмину с соответствующим антигеном при оптимальном рН в присутствии полиэтиленгликоля (ПЭГ). Мутность иммунного комплекса прямо пропорциональна концентрации исследуемого вещества в образце.

РЕАГЕНТЫ

Реагенты при хранении в нераспечатанных флаконах при 2-8 °C стабильны до истечения срока годности, указанного на упаковке.

Содержимое набора и начальные концентрации реагентов:

- РЕАГЕНТ 1

фосфатный буфер 20 ммоль/л pH 7.5, ПЭГ ≥ 5%, хлорид натрия 150 ммоль/л, азид натрия< 0.1%

- РЕАГЕНТ 2

поликлональные антитела к церулоплазмину, азид натрия < 0.1%

Штрих-код и кодовый номер флакона, указанный на этикетках реагентов, относятся к использованию продукта на анализаторах Hitachi 911/912. Пожалуйста, смотрите протокол по адаптации, вся дополнительная информация предоставляется по запросу.

Подготовка растворов

РЕАГЕНТ 1 и РЕАГЕНТ 2: готовы к использованию. Реагенты в нераспечатанных флаконах стабильны до истечения срока действия, указанного на упаковке. После  вскрытия сохраняют стабильность в течение 120 дней при 2-8°C, если избегать контаминации и закрывать флакон сразу после использования.

ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА

Длина волны: 340 (334-365) нм

Оптический путь:1 см

Температура: 37 °C

Образец (см. подготовку)/РЕАГЕНТ 1/РЕАГЕНТ 2: 1/100/12.5

Измерение : по конечной точке (увеличение)

Перед проведением анализа нагрейте реагенты до комнатной температуры.

Пропорциональное изменение объемов реакционной смеси, указанных в аналитической процедуре не влияет на результат.

Внесите в кювету:    Холостая проба  Калибратор          Образец   Контроль

Осторожно перемешайте и инкубируйте в течение 10 минут при рабочей температуре. Измерьте оптическую плотность каждого калибратора, образцов и контролей против холостой пробы.

ВЫЧИСЛЕНИЕ

1. Постройте на миллиметровой бумаге калибровочную кривую, отмечая на оси Y значения оптической плотности соответствующего разведения, а по оси Х значения концентрация для каждого калибратора.
2.  Обозначьте значение оптической плотности образцов и контролей на калибровочной кривой.
3.  Определите значение концентрации аналита в образцах и контролях по калибровочной кривой.

Коэффициент перевода:

церулоплазмин: [мг/дл] x 0.01 = церулоплазмин [г/л]

РЕФЕРЕНТНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ: 20 - 60 мг/дл

Рекомендуется, чтобы в каждой лаборатории были установлены свои собственные референтные значения. В диагностических целях полученные результаты должны оцениваться с учетом истории болезни пациента и других клинических данных.

ХАРАКТЕРИСТИКИ

Интерференция: на результат теста не влияет присутствие билирубина до 30 мг/дл, гемоглобина до 0.5 г/дл, липемии (триглицериды до 1000 мг/дл) и ревматоидного фактора до 70 МЕ/мл.

Диапазон измерений: 5 - 90 мг/дл. Если концентрация образца превышает диапазон измерений, разведите его физиологическим раствором и результаты умножьте на коэффициент разведения.

Нижний предел обнаружения: 2 мг/дл. Нижний предел обнаружения представляет собой самую низкую измеряемую концентрацию исследуемого вещества, которую можно отличить от нулевого стандарта.

Эффект прозоны: эффект прозоны не наблюдается вплоть до концентрации 1500 мг/дл.

КАЛИБРОВКА

Для калибровки рекомендуется использовать следующие материалы:

Калибратор белки плазмы    REF     11200D          3x1 мл

Жидкая калибровочная сыворотка. Использовать калибратор для построения калибровочной кривой как указано в таблице.

ПОСТРОЕНИЕ КАЛИБРОВОЧНОЙ КРИВОЙ

Рабочие калибраторы    1              2                 3                    4

Полученное разведение T.Q.           1 : 2         1 : 4         1 : 8

 [исследуемое вещество] мг/дл с учетом НЕ разведенного

образца 1 x [C]  0.5 x [C]  0.25 x [C]  0.125 x [C]

[C] = концентрация исследуемого вещества в мг/дл указана на вкладыше комплекта Plasmaproteins Cal (калибратор белка).

Исследуемое вещество = церулоплазмин

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Рекомендуется использовать следующие контрольные материалы разных уровней для подтверждения точности анализа:

Иммуноконтроль 1           REF     11210       1x5 мл

Иммуноконтроль 2           REF     11212       1x5 мл

Жидкая контрольная сыворотка. Для использования следуйте инструкции в наборе.

Иммуноконтроль (2 уровня)          REF     11211A    2x(2x1) мл

Жидкая контрольная сыворотка, два уровня. Для использования следуйте инструкции в наборе.

СТАНДАРТИЗАЦИЯ

CAP RPSP-3 (эталонный препарат сывороточного белка, Лот-3) / RPPHS (эталонный препарат белка в человеческой сыворотке.

ОБРАЗЦЫ

Сыворотка или плазма (гепарин, ЭДТА). Собирают образцы в соответствии с процедурой Национального комитета по клиническим лабораторным стандартам, указанной в библиографии (1). Стабильность образцов: 3 дня при 2-8°С.

Подготовка образцов/контролей

Образцы и контроли: не разводить.

Приборы и материалы, необходимые, но не поставляемые

• Стандартное лабораторное оборудование.
• Дистиллированная вода.
• Фотометр со светофильтрами или спектрофотометр.
• Физиологический раствор (хлорид натрия 9 г/л).

Следующие результаты оценки воспроизводимость внутри серии и между сериями анализов, а также точности получены с использованием автоматического анализатора, при случайной выборке и автоматическом разведении образцов. Эти данные могут меняться в зависимости от характеристик прибора.

Воспроизводимость внутри серии анализов: определялась в 20 повторностях каждого контроля (2 уровня - L1/L2). Результаты:

L1: среднее значение 21.71 мг/дл, SD 0.85, CV% 3.92

L2: среднее значение 69.18 мг/дл, SD 2.42, CV% 3.50.

Воспроизводимость между сериями анализов: определялась в течение 10 дней в 2 повторностях для каждого контроля (2 уровня - L1/L2). Результаты:

Точность: тест (у) сравнили с коммерчески доступным иммунотурбидиметрическим методом (x). Результаты: