Описание
Реагент для определения АЛТ. УФ метод.
Оптимизированный УФ-метод в соответствии с рекомендациями Международной Федерации Клинической Химии. Длина волны 340 нм. ДВА ЖИДКИХ РЕАГЕНТА со стартовым субстратом.
Соотношение: Образец/Реагент 1/Реагент 2: 1/11/1.5. Кинетическое считывание. Лаг-фаза 1 мин. Время считывания 3 мин. Линейность 300 Ед/л.
РУССКИЙ |
REF 17234Н Аланин-аминотрансфераза | Кинетическое определение активности Аланинаминотрансферазы (ALT/ALAT/GPT) в сыворотке и плазме, в соответствии с рекомендациями IFCC РЕАГЕНТ 1: 2x65 мл - РЕАГЕНТ 2: 1x19 мл | ![]() |
СТАНДАРТ/КАЛИБРАТОР: термин относится к стандарту/калибратору РЕАГЕНТ: термин относится к отдельному реагенту КОНТРОЛЬ: термин относится к контролю |
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ Помимо возможных рисков, связанных с активными компонентами реактивы могут содержать дополнительные неактивные компоненты, такие как консерванты (например, азид натрия или другие), а также детергенты. Общая концентрация этих компонентов ниже предельно допустимой нормы, предусмотренной директивами 67/548/EEC и 1999/45/EC. Были соблюдены все требования по классификации, маркировке и упаковки реактивов (опасных препаратов). Однако рекомендуется с реактивами работать осторожно, необходимо избегать попадания их в организм, в глаза, на кожу и слизистые оболочки. С реактивами необходимо работать с соблюдением правил надлежащей лабораторной практики. КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ Аланинаминотрансфераза (АЛТ) и аспартатаминотрансферазf (АСТ) являются наиболее важными представителями группы ферментов, катализирующих преобразование альфа-кетокислот в аминокислоты путем переноса аминогрупп. АЛТ является специфическим печеночным ферментом и его активность является маркером заболеваний печени и желчных путей. AСТ является цитоплазматическим митохондриальным ферментом, поэтому повышение активности фермента может отмечаться при инфаркте миокарда, мышечной дистрофии или поражении органов. ПРИНЦИП Аланинаминотрансфераза (АЛТ) катализирует реакцию трансаминирования между альфа-кетоглутаровой кислотой и L-аланина с образованием L-глутаминовой кислоты и пировиноградной кислоты. Образуемая пировиноградная кислота в присутствии лактатдегидрогеназы (ЛДГ), реагирует с бета-NADH2 с образованием молочной кислоты и бета-NAD в том же количестве. Путем измерения изменения величины оптической плотности бета-NAD за фиксированное время можно рассчитать активность фермента в анализируемом образце. РЕАГЕНТЫ Реагенты при хранении в нераспечатанных флаконах при 2-8 °C стабильны до истечения срока годности, указанного на упаковке. Содержимое набора и начальные концентрации реагентов: - РЕАГЕНТ 1: Трис буфер 0.12 моль/л, рН = 7.5; ЭДТА 6.0 ммоль/л; L-аланин 0.50 моль/л, лактатдегидрогеназа ≥ 3 кЕд/л, азид натрия < 0.1 %. - РЕАГЕНТ 2: карбонатный буфер 0.05 моль/л, рН = 9.7; альфа-кетоглутарат 0.12 ммоль/л, бета-NADH2 2.5 ммоль/л, азид натрия < 0.1 %. Подготовка реагентов РЕАГЕНТ 1 и РЕАГЕНТ 2: готовы к применению. СТАБИЛЬНОСТЬ На борту анализатора: 30 дней, избегать контаминации реагента. Калибровка: 14 дней. Перекалибровать при смене лота реагента. КАЛИБРОВКА ВЫЧИСЛЕНИЕ 1. Постройте на миллиметровой бумаге калибровочную кривую, отмечая на оси Y значения оптической плотности соответствующего разведения, а по оси Х значения активности (Ед/л) для каждого калибратора. 2. Обозначьте значение оптической плотности образцов и контролей на калибровочной кривой. 3. Определите значение концентрации аналита (Ед/л) в образцах и контролях по калибровочной кривой. Коэффициент перевода: АСТ: [Ед/л] x 0.01667 = АСТ [μkat/l] РЕФЕРЕНТНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ: Мужчины: ≤ 35 Ед/л Женщины: ≤ 31 Ед/л Рекомендуется, чтобы в каждой лаборатории были установлены свои собственные референтные значения. В диагностических целях полученные результаты должны оцениваться с учетом истории болезни пациента и других клинических данных. ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДА НА АВТОМАТИЧЕСКОМ АНАЛИЗАТОРЕ HITACHI ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ: 2 Ед/л. Чувствительность вычислялась в 20 повторностях и зарегистрирована как "среднее нулевое значение + 3 SD". ТОЧНОСТЬ ВНУТРИ СЕРИИ АНАЛИЗОВ: Определялась в 20 повторностях каждого контроля (L1/L2) и образцах пулированной сыворотки человека (L3). Результаты приведены ниже:
| ТОЧНОСТЬ МЕЖДУ СЕРИЯМИ АНАЛИЗОВ: определялась при проведении 5x2x4 тестов (сутки x серии x повторы) каждого контроля (L1/L2 – 2 уровня) и образцов пулированной сыворотки человека (L3).. Результаты приведены ниже:
Для калибровки рекомендуется использовать следующие материалы: Калибратор для клинической химии REF 16550 4x3 мл Многопараметровая лиофилизированная калибровочная сыворотка. При использовании руководствуйтесь инструкцией, вложенной в набор. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Для проверки точности теста рекомендуется использовать следующие контрольные материалы при различных уровнях определяемого компонента: Контроль для клинической химии 1 REF 16150 6 x 5 мл Многопараметровая лиофилизированная контрольная сыворотка. При использовании руководствуйтесь инструкцией, вложенной в набор. Контроль для клинической химии 2 REF 16250 6 x 5 мл Многопараметровая лиофилизированная контрольная сыворотка. При использовании руководствуйтесь инструкцией, вложенной в набор. СТАНДАРТИЗАЦИЯ В соответствии с рекомендациями IFCC (Международная Федерация по Клинической химии и лабораторной медицине). ОБРАЗЦЫ Сыворотка или плазма (ЭДТА и гепарин). НЕ использовать гемолизированные образцы. Собирайте образцы в соответствии с процедурой Национального комитета по клиническим лабораторным стандартам, указанной в библиографии (1). СТАБИЛЬНОСТЬ ОБРАЗЦА 7 дней при 2-8°C или 12 недель при -20°C. ПРИБОРЫ И МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ • Стандартное лабораторное оборудование. ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА Длина волны: 340 нм (основная) 450 нм (референсная) Оптический путь: 1 см Температура: 37 °C Образец/РЕАГЕНТ 1/РЕАГЕНТ 2: 1/11/1.5 Реакция: кинетика (уменьшение) Перед проведением анализа нагрейте реагенты до рабочей температуры. Пропорциональное изменение объемов реакционной смеси, указанных в аналитической процедуре не влияет на результат. ПРИМЕР ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОЦЕДУРЫ НА АВТОМАТИЧЕСКОМ АНАЛИЗАТОРЕ Время 0 Калибратор/Контроль/Образец = 20 мкл РЕАГЕНТ 1 = 220 мкл Через 300 сек Внесение РЕАГЕНТА 2 = 30 мкл Через 120 сек Считывание 1 Через 180 сек Считывание 2 ТОЧНОСТЬ: Тест на АСТ (y) сравнили с коммерчески доступным методом (x). Результаты указаны ниже: N = 60, r = 0.987, y = 0.90x + 4.97 ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ: На результат теста не влияет присутствие гемоглобина до 300 мг/дл, билирубина до 30 мг/дл и липидов до 1500 мг/дл. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ДИАПАЗОН 2.0 - 300 Ед/л Образцы, в которых концентрация аналита выше 300 Ед/л должны быть разведены 1:10 физиологическим раствором, полученный результат умножьте на 10. УТИЛИЗАЦИЯ ОТХОДОВ Реагенты утилизируются в соответствии с местными нормативными актами. БИБЛИОГРАФИЯ 1) NCCLS Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard - Fifth Edition (H3-A5). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, 2003. 2) Pesce, A.J., Kaplan, L.A.: “Methods in Clinical Chemistry”, Mosby Ed. (1987). 3) Burtis C.A., Ashwood E.R.: “Tietz Textbook of Clinical Chemistry”, W.B. Saunders Company Ed. (3rd edition, 1999). 4) Guder W.G.: “The Quality of Diagnostic Sample”. Recommendations of the Working Group on Preanalytical Quality of the German Society for Clinical Chemistry and the German Society for Laboratory Medicine. (1st Edition - 2001). 5) Jakobs, D.S., Kasten, Jr., B.L., DeMott, W.R., Wolfson, W.L.: “Laboratory Test Handbook”, Lexi-Comp and Williams & Wilkins Ed. (2nd Edition - 1990). 6) Schumann et al - IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37°C Part 5. Reference Procedure for the Measurement of Catalytic Concentration of Aspartate Aminotransferase - Clin Chem Lab Med 2002; 40 (7): 725-733. |
Данные анализов, полученные в лабораториях, – это не просто важная информация для составления диагноза, но и сведения, которые требуются для контроля безопасности и эффективности терапии в условиях лечебного учреждения. При обследовании больного обязательно используется сложное оборудование для аналитики в сочетании с многокомпонентными реактивами и реагентами биохимической природы, которые стали важными элементами процесса. Изучить любой из параметров биохимии крови и иных жидких веществ можно посредством конкретного комплекса реагентов и методик лабораторного происхождения. В состав биохимического анализа входит анализ азотистого, углеводного, липидного, пигментного обмена и обмена белками, а также уровень обмена электролитами. Одним из обязательных лабораторных реагентов является аланинтрансфераза. В медицинской лаборатории должно использоваться только качественное оборудование и реагенты от проверенных производителей. Фасовка реагентов подбирается в зависимости от того, какого масштаба лаборатория их закупает. У нас вы можете приобрести биохимические реагенты высокого качества от надежного проверенного производителя. Биохимические реагенты