Описание

Реагент для определения желчных кислот.

Энзиматический колориметрический метод с NBT. Длина волны 546 нм. Минимальный срок стабильности реагентов 7 дней после приготовления. ДВА РЕАГЕНТА (установленное время реакции 5 мин).

Соотношение: Образец/Реагент 1/Реагент2: 1/2/0.5. Линейность 200 ммоль/л. Стандарт включен.


 

РУССКИЙ

 

REF 17002B

 

Желчные кислоты TBA

Ферментное колориметрическое определение общих желчных кислот в сыворотке

РЕАГЕНТ 1а: 5x10 мл

РЕАГЕНТ 1b: (лиофилизированный) 5x10 мл

РЕАГЕНТ 2: 1x13 мл

СТАНДАРТ: 1х5 мл

1.png

СТАНДАРТ/КАЛИБРАТОР: термин относится к стандарту/калибратору

РЕАГЕНТ: термин относится к отдельному реагенту          КОНТРОЛЬ: термин относится к контролю

 

 

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ

Помимо возможных рисков, связанных с активными компонентами реактивы могут содержать дополнительные неактивные компоненты, такие как консерванты (например, азид натрия или другие), а также детергенты. Общая концентрация этих компонентов ниже предельно допустимой нормы, предусмотренной директивами 67/548/EEC и 1999/45/EC. Были соблюдены все требования по классификации, маркировке и упаковки реактивов (опасных препаратов). Однако рекомендуется с реактивами работать осторожно, необходимо избегать попадания их в организм, в глаза, на кожу и слизистые оболочки. С реактивами необходимо работать с соблюдением правил надлежащей лабораторной практики.

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Общие желчные кислоты метаболизируются в печени и являются маркера функции печени. Повышение уровня общих желчных кислот в сыворотке может быть связано с развитием острого гепатита, хронического гепатита, склероза печени и рака печени.

ПРИНЦИП

В присутствии NAD, фермент 3-альфа гидроксистероид дегидрогеназа (3-альфа HSD) преобразует желчные кислоты в 3-кето стероиды и NADН. Образующийся NADН реагирует с нитротетразолием синим (NВТ) с образованием формазанового красителя в присутствии фермента диафоразы. Интенсивность окрашивания формазанового красителя пропорциональна концентрации желчных кислот в анализируемом образце.

РЕАГЕНТЫ

Реагенты при хранении в нераспечатанных флаконах при 2-8 °C стабильны до истечения срока годности, указанного на упаковке.

Реагенты должны быть прозрачными, не использовать мутные реагенты.

Компоненты набора и начальная концентрация химически активных компонентов:

- РЕАГЕНТ 1а:

буферный раствор фосфата натрия 65 ммоль / л, рН = 7.0; ЭДТА 0.77 ммоль / л; азид натрия < 0.1 %.

- РЕАГЕНТ 1b (лиофилизат):

щавелевая кислота 45 ммоль/л; диафораза 250 Ед/л; NAD+ 2.0 ммоль/л, NВТ 0.25 ммоль/л, 3-оксо-5-бета стероид дельта 4-дегидрогеназа 0.4 кЕд/л.

- РЕАГЕНТ 2:

3-альфа HSD ≥ 500 Ед / л, азид натрия < 0.1 %.

- СТАНДАРТ:

стандарт желчных кислот, концентрация указана на этикетке флакона.

Штрих-код и номер флакона, если они напечатаны на этикетках реагентов, относятся к применению продукта на анализаторах Hitachi 911/912. Подробная информация по адаптации предоставляется по запросу.

Примечания и ограничения:

 

 

 

Информация о реагентах:

- Содержание аналита в Стандарте подтверждается с использованием внутреннего стандарта, полученного при взвешивании чистого вещества.

- Реагент 1а должен быть прозрачным, не использовать мутный реагент.

- Раствор R1 имеет типичное желтое окрашивание.

Приготовление растворов реагентов:

Раствор R1: растворить содержимое одного флакона Реагента 1b в содержимом одного флакона Реагента 1а. Дать отстояться в течение 10 минут и осторожно перемешать.

Стабильность: 7 дней при температуре 2-8°С или 4 недели при температуре -20°С после приготовления, если избегать контаминации и немедленно после использования закрывать флакон.

Реагент 2: готов к использованию. Реагент, при его хранении при температуре 2-8°С в закрытых флаконах, стабилен в течение срока годности, указанного на этикетке упаковки.

Стабильность: 90 дней при температуре 2-8°С после вскрытия, если избегать контаминации и немедленно после использования закрывать флакон.

Стандарт: готов к использованию. Реагент, при его хранении при температуре 2-8°С в закрытых флаконах, стабилен в течение срока годности, указанного на этикетке упаковки.

Стабильность: 120 дней при температуре 2-8°С после вскрытия, если избегать контаминации и немедленно после использования закрывать флакон.

Контроль качества:

Для подтверждения точности теста использовать следующие контрольные материалы для различных концентраций аналита:

Bile Acids Controls        REF 16002А        2 х (2 x 3) (мл).

Лиофилизованный контрольный материал. Для применения следовать инструкциям к тест-набору.

ОБРАЗЦЫ

Свежесобранная сыворотка. НЕ использовать гемолизированные или сильно липемичные образцы. Собирайте образцы в соответствии с процедурой Национального комитета по клиническим лабораторным стандартам, указанной в библиографии (1).

СТАБИЛЬНОСТЬ ОБРАЗЦА

5 дней при 2-8°C.

ПРИБОРЫ И МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ

  • Стандартное лабораторное оборудование.
  • Фотометр со светофильтрами или спектрофотометр

ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА

Длина волны:                  546 (540-570) нм (основная)

Оптический путь:            1 см

Температура:                  37 °C

Образец/Раствор 1/РЕАГЕНТ 2: 1/2/0,5

Реакция:            фиксированное время (увеличение)

Перед проведением анализа нагрейте реагенты до рабочей температуры.

Пропорциональное изменение объемов реакционной  смеси, указанных в аналитической процедуре не влияет на результат.

Внести в кювету:

Бланк образца

Образец

Бланк стандарта

Стандарт

Образец

0.2 мл

0.2 мл

-

-

Стандарт

-

-

0.2 мл

0.2 мл

Раствор R 1

0.4 мл

0.4 мл

0.4 мл

0.4 мл

Тщательно перемешать и инкубировать 5 минут при рабочей температуре. Внести:

Реагент 2

-

0.1 мл

-

0.1 мл

Дистиллированная вода

0.1 мл

-

0.1 мл

-

Тщательно перемешать и инкубировать точно 5 минут при рабочей температуре. Сразу же провести считывание оптической плотности анализируемого образца (AS) и стандарта (AST) относительно оптической плотности бланка образца (ABS) и бланка стандарта (ABST).

Расчеты:

(AS - ABS) / (AST – ABST) x [STD] * = содержание желчных кислот в мкмоль на 1 л анализируемого образца.

* = концентрация желчных кислот в мкмоль, указанная на этикетке флакона со стандартом.

Референтные величины:

Сыворотка (натощак): 0 - 6 мкмоль /л;

Рекомендуется, чтобы в каждой лаборатории был установлен свой референтный диапазон.

ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДА

(определено на автоматическом анализаторе Hitachi):

Интерференция: на результат теста не влияет присутствие конъюгированного и не конъюгированного билирубина в концентрации до 20 мг/дл, гемоглобина в концентрации до 1 г/дл, и триглицеридов в концентрации до 250 мг/дл.

Измеряемый диапазон: 1.0 – 200 мкмоль /л. Образцы с концентрацией выше 200 мкмоль/л необходимо развести физиологическим раствором в отношении 1:10 и полученный результат умножить на коэффициент разведения (10).

Точность внутри серии определений:

определяется в 20 повторах каждого контроля (тестируются два уровня – L1 / L2). Получены следующие результаты:

L1: среднее 6.59 мкмоль /л, SD 0.14, CV % 2.20;

L2: среднее 73.58 мкмоль /л, SD 0.67, CV % 0.91.

Точность между определениями:

определяется в течение 10 дней в 2 повторах каждого контроля (2 уровня – L1/L2). Получены следующие результаты:

 

Среднее мкмоль/л

Внутри серии

Между сериями

Всего

мг/дл

SD

CV%

SD

CV%

SD

CV%

L1

6.63

0.17

2.56

0.22

3.37

0.28

4.23

L2

74.40

1.35

1.82

1.39

1.87

1.94

2.61

Чувствительность: 1.0 мкмоль/л. определяется в 10 повторах физиологического раствора и обозначается как «среднее нулевое значение + 3SD».

Точность: Данный тест (y) сравнивался с коммерчески доступным тестом (х). Получены следующие результаты:

N = 42, r = 0.985; y = 0.98 x + 0.89.

УТИЛИЗАЦИЯ ОТХОДОВ

БИБЛИОГРАФИЯ

  1. NCCLS. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard – Fifth Edition (H3-A5). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, 2003.
  2. Kaplan L. A., Pesce A. J. Clinical Chemistry, Mosby Ed., 1996.
  3. EU-Dir 1999/11 Commission Directive of 8 March 1999 adapting to technical progress the principles of Good Laboratory Practice as specified in Council Directive 87/18/EEC.
  4. Jacobs D. S., Kasten Jr. B. L., De Mott W. R., Wolfson W. L. Laboratory Text Handbook, Lexi-Comp and Williams &Wilkins, 2nd Edition (1990).
  5. Mashige F., Imai K., Osuga T., Clin. Chim. Acta, vol. 70: 79 – 86 (1976).
  6. . Osuga T., Mitamura K., Mashige F., Imai K. Clin. Chim. Acta, vol. 75: 81 – 90 (1977).

Заявка на покупку

Хотите получить больше информации?Обращайтесь к нам:+7 (495) 933-21-46