Описание

Прямой колориметрический тест для определения меди в сыворотке и плазме без депротеинизации. 
 
Длина волны: 582 (570-590) нм.
Длина пути: 1 см.
Температура: 37°С.
Образец/РЕАКТИВ В/Раствор АС: 1/20/1.
Измерение реакции: Конечная точка (увеличение).
Перед проведением анализа нагрейте реагенты до рабочей температуры.
 
Принцип
 
В буферной системе с pH 4.7, медь образует со специфическим комплексоном 3.5-DiBr-PAESA [4-(3.5-дибромо-2-пиридилазо)-N-этил-N-(3-сульфопропил)-анилин] стабильный окрашенный продукт. Интенсивность окрашивания этого комплекса пропорциональна количеству меди в исследуемом образце.
 
Реагенты
 
Компоненты набора, хранящиеся при температуре 2-8°C в невскрытых флаконах, стабильны в течение всего срока годности, указанного на этикетке упаковки. Реагенты должны быть прозрачным; не использовать при наличии мутности.
 
Компоненты набора и концентрации реактивных ингредиентов:

 

REF № 17106

Прямое колориметрическое определение концентрации меди (Cu) в сыворотке, плазме крови, без депротеинизации.

 

Медь

РЕАГЕНТ А: 5 x 10 мл

РЕАГЕНТ В: 1 x 3 мл

РЕАГЕНТ С: порошок

СТАНДАРТ: 1 x 10 мл

СТАНДАРТ/КАЛИБРАТОР: термин относится к стандарту / калибратору

РЕАГЕНТ: термин относится к отдельному реагенту КОНТРОЛЬ: термин относится к контролю

 

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ

Помимо возможных рисков, связанных с активными компонентами реактивы могут содержать дополнительные неактивные компоненты, такие как консерванты (например, азид натрия или другие), а также детергенты. Общая концентрация этих компонентов ниже предельно допустимой нормы, предусмотренной директивами 67/548/EEC и 1999/45/EC. Были соблюдены все требования по классификации, маркировке и упаковки реактивов (опасных препаратов). Однако рекомендуется с реактивами работать осторожно, необходимо избегать попадания их в организм, в глаза, на кожу и слизистые оболочки. С реактивами необходимо работать с соблюдением правил надлежащей лабораторной практики.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ

Двухвалентная медь (Cu ++) образует комплексы с белками. Основными функциями медь содержащих металлопротеинов – это участие в процессах оксиления-восстановления. Наиболее известные медь содержащие ферменты непосредственно реагируют с молекулярным кислородом. В плазме крови примерно 95% меди связано с альфа-2-глобулином церулоплазмином (оксидазой, обладающей фероксидазной активностью). Показано, что тяжелый дефицит меди связан с развитием заболеваний сердца, остеоартритом и остеопорозом костей и суставов. Также при снижении концентрации меди уменьшается антиоксидантная защита.

ПРИНЦИП

В буферной системе с pH 4.7, медь образует со специфическим комплексоном 3.5-DiBr-PAESA [4-(3.5-дибромо-2-пиридилазо)-N-этил-N-(3-сульфопропил)-анилин] стабильный окрашенный продукт. Интенсивность окрашивания этого комплекса пропорциональна количеству меди в исследуемом образце.

РЕАГЕНТЫ

Компоненты набора, хранящиеся при температуре 2-8°C в невскрытых флаконах, стабильны в течение всего срока годности, указанного на этикетке упаковки. Реагенты должны быть прозрачным; не использовать при наличии мутности.

Компоненты набора и концентрации реактивных ингредиентов:

РЕАГЕНТ А

Ацетатный буфер ≥ 1 моль/л, рН 4.7

РЕАГЕНТ В

Комплексон 3.5-DiBr-PAESA 0.4 ммоль/л

Маленькая ложка

РЕАГЕНТ С

Восстановитель: аскорбиновая кислота, порошок

СТАНДАРТ

Стандарт меди 100 мкг/дл (15.73 мкмоль/л)

Штрих-код и кодовый номер флакона, указанный на этикетках реагентов, относятся к использованию продукта на анализаторах Hitachi 911/912. Пожалуйста, смотрите протокол по адаптации, вся дополнительная информация предоставляется по запросу.

ПРИМЕЧАНИЯ И ОГРАНИЧЕНИЯ

1) Используйте одноразовые пробирки и стеклянную посуду промытые 1N раствором соляной кислоты и дистиллированной водой.

2) Информация, специфичная по реагентам:

- Стандартное значение верифицируется с использованием референсного прослеживаемого стандарта NIST (Национальный институт стандартов и технологий).

- Рабочий раствор должен быть прозрачным; не использовать при наличии мутности.

- Реагент A в качестве добавки содержит мочевину. При настройке работы биохимического анализатора со свободным доступом не проводите тест на мочевину сразу после теста на медь.

ПОДГОТОВКА РАСТВОРОВ РЕАГЕНТОВ

Раствор АС: добавьте одну маленькую ложку РЕАГЕНТА С в один флакон с РЕАГЕНТОМ А. Перемешайте до полного растворения. Стабильность: в течение 15 дней после вскрытия при 2-8°C, при условии отсутствия контаминации и плотном закрывании пробирок сразу после использования.

РЕАГЕНТ В готов к использованию. Реагент в невскрытых флаконах стабилен в течение всего срока годности, указанного на этикетке упаковки. Стабильность: в течение 90 дней после вскрытия при 2-8°C, при условии отсутствия контаминации и плотном закрывании пробирок сразу после использования.

СТАНДАРТ: готов к использованию. Реактив в невскрытых флаконах стабилен в течение всего срока годности, указанного на этикетке упаковки. Стабильность: в течение 120 дней после вскрытия при 2-8°C, при условии отсутствия контаминации и плотном закрывании пробирок сразу после использования.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для проверки точности теста рекомендуется использовать следующие контрольные материалы при различных уровнях определяемого компонента:

Контроль для клинической химии 1  REF 16150 6 x 5 мл

Многопараметровая лиофилизированная контрольная сыворотка. При использовании руководствуйтесь инструкцией, вложенной в набор.

Контроль для клинической химии 2  REF 16250 6 x 5 мл

Многопараметровая лиофилизированная контрольная сыворотка. При использовании руководствуйтесь инструкцией, вложенной в набор.

ОБРАЗЦЫ

Сыворотка или плазма (используйте только соли гепарина в качестве антикоагулянта). Собирайте образцы в соответствии с процедурой Национального комитета по клиническим лабораторным стандартам, указанной в библиографии (1).

Стабильность образцов: 24 часа при 2-8°C или 15 дней при -20°C.

ПРИБОРЫ И МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ

• Стандартное лабораторное оборудование.

• Спектрофотометр со светофильтрами.

АНАЛИТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА

Длина волны:

582 (570-590) нм

Длина пути:

1 см

Температура:

370С

Образец/РЕАКТИВ В/Раствор АС:

1/20/1

Измерение реакции:

Конечная точка (увеличение)

Перед проведением анализа нагрейте реагенты до рабочей температуры.

Пропорциональное изменение объемов реакционной смеси, указанных в аналитической процедуре не влияет на результат.

 

Поместить в кювету:

Реагентный бланк

Образец

Стандарт

Дистил.вода

50 мкл

-

-

Образец

-

50 мкл

-

СТАНДАРТ

-

-

50 мкл

РАСТВОР АС

1.0 мл

1.0 мл

1.0 мл

Раствор B

50 мкл

50 мкл

50 мкл

Тщательно перемешайте. Через 4-5 минут при рабочей температуре считайте абсорбцию Образца (ASВ) и Стандарта (AST) против реагентного бланка. Конечное окрашивание стабильно в течение 1 часа.

РАСЧЕТ

[(AS - ASB) / AST] x 100 = мкг меди/дл образца

КОЭФФИЦИЕНТЫ ПЕРЕСЧЕТА

Медь: [мкг/дл] x 0.1573 = Медь [мкмоль/л]

РЕФЕРЕНСНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

Мужчины: 70-140 мкг/дл (11.0-22.0 мкмоль/л)

Женщины: 80-155 мкг/дл (12.6-24.4 мкмоль/л)

Рекомендуется, чтобы в каждой лаборатории были установлены свои собственные референтные значения.

ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДА

Интерференция: на результат теста не влияет присутствие конъюгированного и неконъюгированного билирубина до 15 мг/дл, гемоглобина до 0.5 г/дл и триглицеридов до 1000 мг/дл.

АНАЛИТИЧЕСКИЙ ДИАПАЗОН:

3.0 - 500 мкг/дл.

Если концентрация в образце превышает диапазон измерений (500 мкг/дл), разведите его физиологическим раствором 1:10 и результаты умножьте на коэффициент разведения (10).

ВНУТРИАНАЛИТИЧЕСКАЯ ТОЧНОСТЬ:

Определяют в 20 повторностях (на анализаторе Hitachi 717) на каждый контроль (тестировали 3 уровня - L1/L2/L3). Результаты были следующие:

L1: среднее 71.80 мкг/дл, SD 2.19, CV% 3.05

L2: среднее 120.65 мкг/дл, SD 2.64, CV% 2.19

L3: среднее 170.65 мкг/дл, SD 2.68, CV% 1.57.

ТОЧНОСТЬ МЕЖДУ СЕРИЯМИ АНАЛИЗОВ:

Определяют в течение 10 дней в 2 повторностях (на анализаторе Hitachi 717) каждого контроля (3  уровня - L1/L2/L3). Получены следующие результаты:

 

Среднее

 

Внутри серии

Между сериями

Всего

Всего

 

мкг/дл

SD

CV%

SD

CV%

SD

CV%

L1

72.60

2.41

3.32

0.96

1.32

2.59

3.57

L2

121.20

2.98

2.46

1.06

0.87

3.16

2.61

L3

170.00

1.97

1.16

1.76

1.04

2.65

1.56


ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ:

Чувствительность: 3 мкг/дл. Чувствительность рассчитывалась при трехкратном измерении 20 проб физиологического раствора и выражалась как "среднее нулевое значение + 3 SD".

ТОЧНОСТЬ:

Данный метод (y) сравнивали с методом атомной абсорбции (x). Результаты были следующими:

N = 60, r = 0.9624, y = 0.9774x  + 2.5776

УТИЛИЗАЦИЯ

Реагенты утилизируются в соответствии с местными нормативными актами.

БИБЛИОГРАФИЯ

1) NCCLS Document: “Procedures for the Collection of Arterial Blood Specimens; Approved Standard - Third Edition (1999)”.

2) Kaplan, L.A., Pesce, A.J.: “Clinical Chemistry”, Mosby Ed. (1996).

3) EU-Dir 1999/11 Commission Directive of 8 March 1999 adapting to technical progress the principles of Good Laboratory Practice as specified in Council Directive 87/18/EEC.

4) Jakobs, D.S., Kasten, Jr., B.L., Demmott, W.R., Wolfson, W.L.: “Laboratory Test Handbook”, Lexi-Comp and Williams & Wilkins Ed. (2nd Edition - 1990).

5) Abe, A., Yamashita, S., Noma, A.:"Sensitive, direct colorimetric assay for copper in serum". Clin.Chem., 35/4, 552-554 (1989).

 

Характеристики

Код заказа17 106

Заявка на покупку

Хотите получить больше информации?Обращайтесь к нам:+7 (495) 933-21-46